绒山羊的繁殖技术
发布日期:2015/11/20 点击次数:2125次 作者:管理员
绒山羊的繁殖技术
绒山羊的繁殖技术
第一节 生殖器及其生理机能
公羊的生殖器管及其生理功能、母羊生殖器管及其生理功能。
第二节 发情生理及发情鉴定
公羊的性行为与性成熟、母羊的初发情与性成熟、母羊的发情和发情周期、发情检测方法
第三节 配种时间和方法
配种时间的确定、配种方法
第四节 绒山羊的妊娠检查
一、妊娠期
二、妊娠期的早期判断
第五节 绒山羊公羊诱导母羊发情
第六节 第六节 人工授精技术
一、拟定人工授精计划
二、人工授精前的准备工作
三、人工授精
第七节 绒山羊冷冻精液的制作及输精
一、颗粒冷冻精的制作
二、细管冻精的制作
三、冻精的解冻
四、冷冻精液的数精效果
五、 冻精质量评定
第八节 冷冻容器的选择和冷冻时间要求
一、容器容量
二、冷冻容器类型
三、冷冻时间技术要求
第九节 提高绒山羊冷冻精液配种受胎率的技术措施
第十节 提高绒山羊繁力的有效方法
第一节 生殖器及其生理机能
一、公羊的生殖器管及其生理功能
公羊的生殖器有睾丸、附睾、输精管、副性腺、阴茎等组成。公羊的生殖器具有生产精子、分泌雄性激素以及交配的功能。
1. 睾丸 睾丸的主要功能是生产精子和分泌雄性激素。睾丸分左右两个,曾椭圆形。它和副睾被白色的致密结缔组织膜包围(白膜)。白膜向睾丸内部延伸,形成许多小隔子,将睾丸分成许多搞玩小叶,每个小叶有3~4个弯曲的精细管,称曲细精管。这些精细管到睾丸纵隔出汇合成为直细精管,直细精管在纵隔内形成睾丸网,精细管是产生精子的地方,睾丸小叶的间质组织中有血管、神经和间质细胞,间质细胞产生雄性激素。
2. 附睾 附睾是贮存精子和精子最后成熟的地方。也是排出精子的管道。此外,附睾管得上皮细胞分泌物可供给精子营养和运动所需的物质,附睾附着在睾丸的背后缘,分头、体、尾三部分。附睾的头部有睾丸网分出的睾丸输出管构成,这些输出管汇合成弯曲的附睾管而形成附睾体和尾。
3. 输精管 输精管是精子由附睾排出的通道,它是一厚壁坚实的束状管,分左右两条,从附睾尾部开始由腹股沟进入腹腔,在向后进入骨盆腔到尿生殖道起始部背侧,开口于尿生殖悼粘膜形成精阜上。
4. 副性腺 副性腺包括精囊腺、前列腺和尿道球腺。副性腺的分泌物构成精液的液体部分。
精囊腺位于膀胱北侧,输精管壶腹部外侧,与输精管共同开口于精阜上,分泌物为淡乳白色粘稠液体,含有睾浓度蛋白质,果糖、柠檬酸盐等成分,供给精子营养和刺激精子运动。
前列腺位于膀胱于尿道连接处的上方。 公羊的前列腺体部分不发达,有扩散部构成。其分泌物是不透明、粘稠的蛋白样液体,成若碱性,能刺激精子,使其活力增强,并能吸收精子排出的二氧化碳,有利于精子生存。
尿道球腺位于骨盆腔出口处上方,分泌粘液性和蛋白样液体,在射精以前排出,有清洗和润滑尿道的作用。
5.阴茎 阴茎是公羊的交配器官,主要有海面体构成,包括阴茎海绵体,尿道海绵体,尿道贯穿于尿道海绵体,海绵体外为纤维膜和外部皮肤。
二、母羊的生殖器管及其生理功能
母羊的生殖器管主要有卵巢、输卵管、子宫、阴道以及外生殖道等部分组成。
1. 卵巢 母羊的卵巢是主要的生殖腺体,位于腹腔肾脏的下后方,有卵巢系膜悬在腹腔靠近体壁处,左右各1个,成卵圆形,长约0.5~1.0厘米,0.3~0.5厘米。卵巢组织结构份内外两层,外层叫皮质层,可产生滤泡,生产卵子和形成黄体,内曾是髓质层,分布有血管、淋巴和神经。卵巢的功能是产生卵子和分泌次性激素。
2. 输卵管 输卵管位于卵巢和子宫之间,为一弯曲的小管,管壁较薄。输卵管的前口呈漏斗状,开口于腹腔,称输卵管伞,接纳由卵巢排出的卵子,。输卵管靠近子宫角的一段较细,称为峡部。输卵管是精子和卵子受精结合和开始卵裂的地方,并能将受精卵输送到子宫。
3.子宫 子宫由两个子宫角、1个子宫体和1个子宫颈构成。位于骨盆腔前部,直肠下方,膀胱上方。子宫口伸缩性极强,妊陈子宫由于其面积和厚度增加,其重量比未妊娠子宫能增大十倍。子宫角和子宫体的内必有许多盘状组织,称子宫叶,是胎盘附着母体取得营养的地方。子宫颈为子宫和阴道的通道。不发情和怀孕时子宫颈收缩得很紧,发情时稍微开张,便于精子进入。子宫的生理功能:发情时借肌纤维由节律的强而有力的收缩作用而运送精液。分娩时子宫以其强有力的阵缩而排出胎儿。 是胎儿发育生长的地方,子宫内膜形成的母体胎盘与胎儿胎盘结合成为胎儿于母体交换营养和排泄的器官。 在发情期前,内膜分泌的前列腺素F2·对卵巢黄体由溶解作用,一直黄机能减退,在促卵泡素的作用下引起母羊发情 。解剖结构 山羊子宫颈长3~4㎝,3~6皱褶,绵羊6㎝,5~8个皱褶;输卵管伞部开口直径;山羊4㎜,绵羊5~6㎜。
4.阴道 是交配器官和产道,前接子宫颈口,后接阴唇,靠外部1/3处的下方为尿道口,其生理功能是排尿,发情时接受交配,分娩是胎儿产出的通道。
第二节 发情生理及发情鉴定
绒山羊是季节性多次发情的家畜。当生殖器官发育完全,性腺中形成性细胞和性激素是称为性成熟。绒山羊得性成熟约3~6月龄,此时羔羊出现各种性活动现象,称为发情。但仍处于强烈生长发育阶段,一般不易配种。以免影响本身及胎儿的生长发育。绒山羊的初情期一般初现在性成熟后的第一个繁殖季节,即6~9月龄。一般早期出现,生长发育良好,在第一个繁殖季节体重达到成年体重的60%~70%母羔羊可以配种。否则即在它出生的第二个繁殖季节参加配种。
小公羔在3月龄出现爬跨,并射精。因此,没有种用价值的公羔要尽早去势。留为后备公羊的小公羔要尽可能早的与母羊和母羔分群。1岁半公羊实行控制配种,两岁以上大量使用。
绒山羊的繁殖终止年龄,母羊约8~10岁,公羊约6~7岁。
一、公羊的性行为与性成熟
公羔的睾丸内出现成熟的、具有受精能力的精子时,即是公羊的性成熟期。一般公羊的性成熟期为5~7个月龄。性成熟的早晚受品种、营养条件、个体发育气候等因素的影响。
公羊得性行为主要的表现为性兴奋,求偶,交配。公羊表现性行为时,常有举头、口唇上翘,发出连串叫声,性兴奋发展到高潮时进行交配。公羊交配动作迅速,时间仅为十秒。
二、母羊的初发情与性成熟
母羊得性机能的发展过程一般分为初情期、性成熟期及繁殖机能停止期。
母羊幼龄期的卵巢及其他性器官均处于为发育状态,卵巢内的卵泡在发育过程中多数萎缩闭锁。随着母羊的生长、发育道一定的年龄和体重时,母羊即发生第一次发情和排卵,即为初情期。此时,母羊虽有发情表现,但不完全,发情周期也往往不正常,其生殖器管仍在生长发育中。此后,垂体前叶产生大量促性腺激素时放到血液中,促进卵泡发育,同时,卵泡产生雌激素释放到血液中,刺激生殖道的生长和发育。山羊得初情期比绵羊的初情期早,一般为5~7个月龄。
母羊到了一定的年龄,生殖器官已发育完全,具备了繁殖能力,成为性成熟期。性成熟后,就能够配种怀胎并繁殖后代,但此时身体的生长发育尚未成熟,故性成熟并不意味着最适配年龄。实践证明,幼畜过早配种,不仅严重的阻碍其本身的生长发育,而且也严重影响后代体质和生产性能。母羊达到性成熟为6~8月龄。绒山羊母羊得性成熟期迟早主要取决于个体、气候和饲养管理条件等因素。体况发育良好的性成熟早,温暖地区较寒冷地区为早,饲养管理好的性成熟也较早。但是,母羊初配年龄过迟,不仅影响其繁殖进程,而且也会造成经济上损失。因此,要提倡适时配种,一般而言,在其体重达成年体重70%是即可开始配种。母羊适龄配种时间为10~18月龄。
三、母羊的发情、发情持续期和发情周期。
1.发情 母羊能否正常繁殖,往往决定于能否正常发情。正常发情,是指母羊发育到一定程度所表现的一种周期性的性活动现象。母羊发情包括3方面的变化:
(1) 母羊的精神状态
(2) 生殖道的变化
(3) 卵巢的变化
绒山羊发情症状明显于绵羊
公山羊对母山羊由明显的诱导发情作用。
2.发情持续期
母羊每次发情持续的时间称为发情持续期,绒山羊发情持续期为24~48小时。母羊第一次排卵一般多在发情后期,成熟卵排出后在输卵管中存活的时间约为4~8小时,公羊精子在母羊生殖道内受精作用最旺盛的时间越为24小时,为使精子和卵子得到充分结合的机会,最好在排卵前数小时内配种。因此,比较适宜的配种时间应在发情中期。
发情持续期 山羊为34~40小时,绵羊为24~36小时;
绒山羊排卵时间 山羊在发情开始后34.5α±6.6小时,绵羊却为26小时;
3.发情周期
即母羊从上一次发情开始到下次发情的间隔时间,在一个发情期内,未经配种或虽经配种而未受孕的母羊,其生殖器官和机体发生一系列周期性变化,会再次发情,绒山羊发情周期平均为21天18~24天。
发情周期 山羊平均17~19天;绵羊16~17天;
四、发情鉴定
母 羊 发 情 鉴 定 |
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(2) 公羊试情法 公羊戴上试情布,放入母羊群中,开始嗅闻母羊外阴。发情好的母羊会主动靠近公羊并与之亲近,摇尾,接受公羊爬跨。试情公羊的比例以1:20~30为宜。试情布应大小适中,常洗常换,保持卫生。 (3) 阴道检查法 发情母羊阴道充血、湿润、有透明粘液流出,子宫颈口松弛、开张,呈深红色。 (4) 公羊瓶试情法 在公山羊的角基部与耳根之间分泌一种性诱激素,以毛巾用力揩擦后,将毛巾放入玻璃瓶中。发情母羊对瓶中气味敏感,前去嗅闻。 |
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发情鉴定的目的是及时发现发情母羊。正常掌握配种或人工授精时间,防止误配漏配,提高受胎率。在发情季节中,母羊定期的随着卵泡发育成熟而出现发情现象。羊的发情期短,又无法进行直肠检查。目前发情的鉴定主要靠试情和外表观察。
母羊发情鉴定一般采用外部观察法、阴道检查法、试情法等几种方法
1.外部观察法
发情症候的外表表现:精神不安,食欲减少,经常啼叫,主动接近公羊,接受公羊和其他母羊爬跨,或爬跨其他母羊,不断摇摆尾巴,频频排尿,阴唇红肿,有少量透明粘液流出。成年母羊比初配母羊发情症状明显。母羊发情象征着卵泡发育成熟,排卵时间在其发情终以前,即开始发情后的28--40小时。发情后来配种或配而未孕的母羊,经过一定时间再次发情,两次发情的间隔时间称发情周期。秋季是绒山羊的发情旺盛时期。气候凉爽时、有利于山羊得性活动。母羊营养不良时,不发情或迟发情。
2. 阴道检查法
3.试情法 是将试情公羊通过保险处理,按1:40~50定时放入母羊群中,公羊寻找发情母羊,发情母羊主动接受公羊的逗引和爬跨,从而发现发情母羊。
(1) 试情公羊的准备
(2) 试情公羊的管理
(3) 试情方法
第三节 配种时间和方法 (配种时间、输精次数、输精量)
一、配种时间的确定
掌握发情时间,发情持续期和排卵时间,以便做到适时配种。在生产实践中,由于发情开始时间和排卵的具体时间不易掌握,均采用两次较配和输精。即在每天的早晚试情,发现发情的母羊立即交配或输精一次,约隔12 小时在复配一次。
公羊每次射精量约1毫升(0.4~1.5),每毫升含精子量约20~50亿。以最适时间,向子宫颈口内0.5~1.0㎝深处一次输精0.1~0.2毫升稀释精液精子总数为亿。相隔12小时再输精一次,可以保证好的受胎率。
绒山羊发情、配种时间(小时)
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发情前期 |
真发情期 |
发情后期 |
排卵和受精 |
持续时间 |
6~10 |
12~22(平均18) |
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发情后的阶段时间 |
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 |
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输精时间 |
太早 适期 适期 太迟 |
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最适期 |
二、配种方法
1.混群自然(自由)交配 这是一种公、母羊在平时分群管理,到配种时按公母 1:30--50只向母羊群中放入公羊,混群管理、交配。这种方法可以节省人力。但无法进行系谱记载,所需的公羊数量大。在每个群放入公羊时,又注意公羊以强欺弱的争斗行为。放入同一群的公羊应尽量做到体力、性欲、体格大小的匀称。
2.分群定时交配 在配种季节,母羊单独放牧和公羊单独管理,只是在母羊每晚归牧时把公羊放入母羊群中,早上初牧时,再分开公母羊。这种方法可时公羊得到良好的休息和饲养保证母羊较高的受胎率。
人工辅助交配
3.人工授精 扩大公畜,特别是优良公畜的利用率 ,保证选中选配的进行,提供完整的配种纪录,建立育种系谱档案。提高受胎率,杜绝某些疾病的传播。
第四节 绒山羊的妊娠检查
一、妊娠期
母羊配种后20天不再发情,则可初步判断已经怀孕。羊从受孕到分娩这一段时间叫妊娠期。羊的妊娠期一般为5个月左右,但因品种、胎次、年龄、单双羔、饲养管理条件等因素而略有差异。如青壮年比老龄羊短些,营养良时,羊的妊娠短些,双羔比单羔妊娠期短些。
母羊妊娠后,为做好分娩的准备工作,应准确推算预产期,预产期的推算方法是:配种月份加5,配种日期数减2。
二、妊娠期的早期判断
配种后的母羊进行早期妊娠判断,及时发现空怀母羊,以便采取补配措施,同时对已受孕的母羊加强饲养管理,避免流产,这样可以提高羊群的受胎率和繁殖率。妊娠的早期判断有以下几种方法:
1.外部观察法(触诊法)
母羊妊娠后,一般外观上表现为发情周期停止,食欲增进,营养状况改善,毛色润泽,性情变的温顺,行为谨慎安稳,腹部逐渐变大,乳房也逐渐胀大。在实践生产中,配种后2个月以上的母羊,可以通过人工检查已确认是否怀孕,这种方法一般在早晨空腹时进行。检查者将母羊的颈夹在两腿中间,弯下腰将两手之叉开从两侧放在母羊腹下乳房前方,经腹部微微托起,并以左手将母羊右腹向左方反复推来感觉有无较硬的小块。一般60天以后的胎儿可以摸到较硬的小块。90~120天的胎儿能摸到后腿的腓骨育由软变硬。当手托腹部,手感有一硬块时,仅有一个胎儿,如若两边各感有一硬块时为两羔。
2.阴道检查法
母羊妊娠后,生殖系统由于胚胎的存在而出现一系列协调一致的变化,如阴道粘膜的色泽、干湿状况,粘液性状(粘稠度、透明度和量),子宫颈形状位置等,这些变化可作为妊娠诊断依据。
阴道粘膜 阴道粘液; 子宫颈
3.免疫学诊断法
早期怀孕的羊含有特异性抗原,而且在受孕后第二天就能从一些羊的血液里检查出来,在第8天经常可以从所有试验母羊的胚胎、子宫及黄体重鉴定出来。这种抗原是和红细胞结合在一起,用它制备的抗怀孕血清,和怀孕10~15天期间母羊的红细胞混合时出现红细胞凝集作用,如果没有怀孕,红细胞不发生凝集作用。
4.超声波探测法
5.孕酮水平测定法
第五节 绒山羊公羊诱导发情和同期发情
公母羊长期分离管理,在配种季节把公羊放入自然交配群或试情公羊放入人工授精群中,可以诱发母羊的发情。阿克苏老虎台绒山羊试验站,按公母1:30的比例放入公羊,实行自然交配,半月内有80%的母羊受配受胎,产羔期比较集中。在1800余只母羊的人工授精站,利用每天试情,第六天母羊发情的数突增,第九天到最高峰,当天发情配种母羊数占全部母羊数的19%。到第十五天高峰陡然下降,这时已有70%母羊受配。从开始的第九天到26~27天出现第二个高峰期。
一、绒山羊的诱发发情
绒山羊一般在春季即非配种季节不表现发情行为,但在非配种季节用外用激素处理后,母羊的卵巢反应及发情表现比绵羊明显的多。因此,可用外源激素处理母羊,已达到一年两产或两年三产的目的。
用外源激素诱发母羊有多种方法,广泛采用的主要有两种。一种是阴道海绵拴法;另一种是耳部皮下埋植法。
1.阴道海绵拴法 由于我国阴道海绵拴质量不够稳定,存在容易掉拴等缺点。
2.耳部皮下埋植法 以埋植法为好。新疆畜牧所得具体做法是,将0.5㎜人工授精用细管剪成1.8~2㎝长,一端火烫封口。用针在管壁上扎20个小孔,每排5个,共四排。然后浸入70%酒精中15分钟,取出待酒精挥发后装入40毫升十八甲基炔诺酮或甲地孕酮。用以用套管针将孕激素管植入母羊耳根附近。
绒山羊埋管以9~11天为好。取管前来年给母羊肌肉注射孕马血清促性腺激素500~700国际单位。也可在取管前一天肌注促卵泡素,连续3次(隔12小时一次)或两次。剂量为50单位、40单位、30单位。取管后立即将公羊引入诱情。30头试验羊100%发情,多数在取管后12~14小时表现发情,部分在取管后立即发情。发情后按常规配种。在发情后一定时间静脉注射促黄体激素或稀释激素获得了较好的排卵效果。
二、羊的同期发情
同期发情是绒山羊较为重要的一种繁殖措施。这项工作能时母羊定期集中配种和产羔。有利于组织生产,实行一年两产和两年三产。
在春季诱发发情实际上也是一种同期发情。只不过是把诱发发情用于乏情期。同期发情多用于配种季节,同期发情多用于配种季节。在配种季节,发情母羊先不配种,于发情周期的第8或9天,按诱发发情的方法,在母羊耳部皮下埋植30~40毫克十八甲基炔诺酮或其他孕激素管,或者给所有要处理的母羊都埋植入孕激素。并配合使用前列腺素F2能获得较为理想的效果,但费用较高。
第六节 人工授精技术
一、拟定人工授精计划 编制选中选配计划,确定参加人工授精用得公母羊。计划产羔时间来确定人工授精开始时间。
二、人工授精前的准备工作
1.种公羊
种公羊在配种前1。5个月进入准备期的饲养管理。半个月前进入配种其的饲养管理。配种前对种公羊作精液品质检查、挑选。调教种公羊适应于假阴道的采精。使用的种用公羊必须具备下列条件:
(1)在经济性状品质上符合选配计划的要求
(2)在精液品质是符合人工授精用的要求
种用公羊必须由专人负责,进行良好的科学饲养管理
2.试情公羊 试情公羊是检出发情母羊的重要工具,要求健康无病,性欲旺盛,年轻灵活。需要进行外科手术或激素处理后用于
试情的羊必须提前准备好。如用试情布的方法试情,也要提前作安全检查。
3.器械和药品的准备 采精架、假阴道、试情布、集精杯、显微镜、输精器、开膣器、纱布、脱脂棉、消毒器械、消毒用和配置稀释液用的药品试剂等要做充分准备。
4.验精室、输精室、采精室、试情圈、要提前消毒。配种器内要定时消毒。所有用具都要保持干净。凡要进行消毒的器械,每天都要清洗和消毒。
三、人工授精
挑选发情母羊。每天早晚将试情公羊按公母1:50~80放入母羊圈进行试情。即使把接受爬跨的母羊隔离出来准备输精。
1.采精设备准备
把洗净晾干的内胎装在外胎上结紧扎牢,使用前从水灌入适量的约160毫升50度的水,采集精液试水温为40度,吹入一定量的气体,是内胎保持松紧适度的三角形。假阴道一端装上消过毒的集精杯,另一端以玻璃棒取消毒凡士林涂于前1/3处,保持润滑。
2.准备台羊
要选用发情症状明显,身体结实的母羊做台羊。并保持台羊臀腿两侧整齐干净, 将台羊的颈部夹在采精架上,保持直立状态。
3.采精
采精员蹲在台羊左侧,右手持假阴道。假阴道与地面呈3540度角,当公羊爬跨时,用左手轻托阴茎包皮,自然准确的把阴茎道入假阴道内,当公羊腰部猛向前伸,即表示射精。待公羊前肢离开母羊时,将假阴道顺从公羊后移取下,竖起。使集精杯的一端向下,放气,去下集精杯并加盖,并送验精室检查,用热碱水洗去假阴道内胎上残留的凡士林。在用温水冲洗,干燥备用。
5.精液品质检查
眼观精液颜色,鼻嗅气味,正常为乳白色。凡有腐败、臭气味、混有红绿色的精液不能使用。
用清洁的玻璃棒蘸取精液一小滴,放在载玻片上,取一盖玻片,先将一端倾斜(30~40℃)接触载玻片上精液,然后轻轻放下,盖上精液。将玻片移至栽物台上镜检。
(1)密度 视野内精子间几乎无空隙者评为“密”,如精子间的空隙等于一个精子的长度者评为“中”,超过一个精子长度者为、“稀”,无精子者为“无”。
(2)活力 100%的精子呈直线向前运动评为5分,80%、60%、40%、20%分别评为4、3、2、1分。在鲜精中,密度为中以上,活力为4、5者用于输精。
6.精液稀释 鲜精的稀释方法有多种,一般以牛奶、 生理盐水按照1;2~5的比例进行稀释。
7.输精 将发情的母羊颈部固定在配种架上,手提尾巴,用泡沫塑料或用纱布蘸高锰酸钾液擦洗净外阴部。用开膣器打开阴道,把装有精液并调整到一定量的输精器尖端通过开膣器中央深入子宫颈口内0.5~0.1厘米,轻轻注入精液,迅速撤出,再合上,并抽出放入消毒液中,浸泡5分钟后移入清水中漂净后,放入生理盐水中待用。
8.做好授精纪录、授配记号、记录采集时间,射精量
第七节 绒山羊冷冻精液的制作及输精
开展绒山羊的精液冷冻,扩大和推广冷冻精液配种,是解决种羊不足,进一步提高优秀种用公羊利用率的有利方法。
冷冻精液是一项动物繁育技术,如果不用科学仪器在生产中进行监测,不遵循先进的冷冻程序是很难保证冷冻精液的质量的。
绒山羊冻精稀释液可以用低温冷冻和超低温冷冻长期保存,但冻精稀释液经解冻再行冷冻发生变质,不能用于制作冻精。因此为了方便可分次使用,在用低温和超低温保存冻精稀释液前,将稀释液分别盛装于不同的容器中,根据冻精生产量来决定稀释液的解冻数量一同时,解冻稀释液的水温不应超过37℃,以免稀释液中的卵黄变性。随着对山羊精液研究的不断加深,研究者发现山羊的精清中含有磷脂酶、类磷脂酶、磷酸酶等许多物质, 当与卵黄接触后会使卵黄凝固,产生对精子有毒害和损伤作用的物质,致使精液酸度增高,造成精子死亡。卵黄作为山羊冻精稀释液的常用成分,来源广、价格便宜,其作用是多方面的,目前尚未发现有比较理想的物质可以完全代替卵黄。因此,要避免发生上述不良反应,就必须将精清中的有害物质除去,再与含卵黄的稀释液接触。离心去精清技术早在20世纪70年代曾用于对猪、马的精液浓缩,以便于制作冻精,后来逐渐发展到分离山羊的精子和精清,用于低温较长时间保存鲜精和制作冻精,并获得了一定的效果。为了检验该项技术对绒山羊细管冷冻精液的作用,笔者做了如下试验:用离心的方法去除绒山羊精液中的精清,然后再用含有卵黄的稀释液对精液进行稀释,制作绒山羊细管冻精,获得了比较好的效果。
一、颗粒冷冻精的制作
1.采精、验精 采精、验精同人工授精部分。
2.稀释液的配置 稀释液的种类,可以在实践中筛选。这里介绍几种
(1) 双蒸水100毫升;蔗糖10克;乙二胺四乙酸钾钠2.0克;甘油6毫升。
另外每毫升中加青霉素1000单位,链霉素1000毫克。
(2)双蒸水100毫升;蔗糖4克;柠檬酸钠4克;甘油9毫升;卵黄30毫升。
每毫升中加青霉素1000单位,链霉素1000毫克。
先将糖类,盐类定量溶解,高压消毒,至室温后,在无菌间内加入甘油合卵黄及抗生素类,分装成安瓶。
稀释液配方:乳糖4.5g,葡萄糖3.1g,柠檬酸钠1.4g,EDTA0.02g,Tris0.12g,加入双蒸馏水100g。水浴煮沸,待溶液温度降至37~C后,加入乙二醇5.Oml,卵黄20ml,青霉素、链霉素各107YIU,充分混匀后备用,
3.平衡 将来检的新鲜精液用稀释液在等温条件下,按1:2~4倍稀释。在5度冰箱内平衡35小时。
4.滴冻保存 把平衡过的精液采用液氮熏蒸法滴冻。然后将精粒收集装袋,并注明种公羊号、品种,精液品质和采精器期。投入液氮内保存。
二、细管冻精的制作
细管冷冻精液比颗粒冷冻精液更为广泛的应用于家畜改良配种中,是因为它比颗粒冷冻精液污染小、使用方便。而倍受繁殖界喜欢。然而细管冷冻精液的制作细管是否方便,能否在简单的设备条件下制作,
1.5.1 精液稀释与去精清对照组精液在33℃水浴条件下保存。试验组精液在33℃条件下加入等温的2.9%柠檬酸钠溶液至5ml,离心机置于33℃恒温箱内,稀释、离心均在恒温箱中进行。在对精液进行离心处理时,启动后缓慢提高转速,经1min后调升至规定转数,离心时间为12min。弃去上清液的试验组与对照组在33℃等温条件下加入配制好的稀释液。
1.5.2 灌装降温平衡与冷冻各组精液稀释后装入0.25ml细管,降温平衡2.5h,在4℃停留0.5h,然后在-100~C±5℃条件下冷冻3min后浸入液氮中。
三、冻精的解冻
在40度恒温下进行解冻,解冻后精液在37~38度的保温箱用显微镜观察活力。凡解冻后的活力在0.3以上者可以用于输精。
1. 水温要求
水温达到要求温度,一般颗粒精液要求40~42℃ ,细管精液要求60~62℃ 。
2.操作要求
这时用吸管取0.5 mL解冻液注入试管后放入茶缸热水中,助手扶好试管,若是颗粒型冷冻精液可直接从液氮罐内取出放入试管内轻轻摇动全融即可。若是细管型冷冻精液则需用镊子从液氮罐内迅速夹出,放在试管口处,用剪刀快速剪断,一般剪4~5刀,迅速轻摇全融即可。
随后用输精管吸出少许进行镜检,合格的以备输精。
3.操作要点
操作要掌握四快:即精液从液氮罐内快取,往预热好的解冻液中快投,适度摇动促其快融,解冻后输。这样才能保证解冻后的精子有较高的活率,为提高受胎率打下良好的基础。
四、冷冻精液的数精效果
试验证明2个月内的山羊冷冻精液颗粒输精效果高于绵羊,基本接近于鲜精人工授精的受胎率,还可以大量的节约精液。
五、 细管冻精质量评定
1.6.1 活率采用以往的方法,即精液200倍稀释后滴入红细胞计数板上,立即在400倍显微镜下观察计数不运动的精子数,然后将计数板置于50~C下10min,以杀死精子,再次计数。根据活精子数与总精子数之比,计算出活率。
1.6.2 顶体完整率采用姬姆萨染色法,在双筒带油镜头的1000倍光学显微镜下观察,按常规方法进行统计。
1.6,3 存活时间在37~C下,存活总时间减去最后2次检测间隔时间的一半。。辽宁绒山羊新鲜精液用2。9%的柠檬酸钠溶液稀释后,以800~1 200r/min进行离心,弃去上清液,用本试验所提供的含卵黄稀释液5倍稀释,降温平衡2。5~3h,在-100~C±5℃条件下冷冻效果良好,可明显提高细管冻精的冷冻效果,因此可以引入辽宁绒山羊细管冻精的制作工艺中。
第八节 冷冻容器的选择
冷冻温度影响精液冷冻后的存活率、顶体完整率、受精率等生物参数。冷冻后精子存活率的高低通过低温温度计测定精液在冷冻容器中冷冻的变化来反映精液速冻温度的变化曲线。尤其冻制细管精液时如果不考虑冷冻容器和冷冻环境的温度及每批精液冷冻总容量,而是盲目地根据精液和冷源的距离决定冷冻温度是不准确的,这样导致精子活率低而达不到国标要求。
一、容器容量
冷冻容器的容量有5、17、40和6o升。冷冻绒山羊精液时,根据量的多少来选用适合的容器,通常选用5升液氮罐效果较好,5升容器容量小,操作方便。当在5升容器里放置150支细管开始冷冻时,冷冻面温度很快达到危险温区,如果每批冻制数量过多会造成冷冻精液活率不均匀,甚至每头份之间有差异,使得细管冻精3区段的不同层次有明显差异。颗粒精液造成表里层产生差异。因此在实际生产中,若选用5升液氮容器冻制时,每批细管控制在100支以下为宜。
二、冷冻容器类型
冷冻精液的质量与冷冻环境进行热交换的速度有关,精液和冷冻面温度变化营同步进行。精液接触冷冻容器的冷冻面以后,温度呈直线下降,当精液和冷冻面温度相等时,进入热平衡温区,维持一个短暂时间后,精液温度又出现下降,达到要求温度后浸入液氮,精液的降温,要求快速通过危险温区,随着降温梯度精液温度又呈现快速下降。目前承载细管精液用冷冻架子,细管精液用架子排板冷冻,冷冻面的温度迅速上升,在维持一段时间后,伴随精液温度同步下降,由于精液和冷冻面在冷冻前存在极大的温差,细管冻精构成不同的冷冻温度。细管型冷冻精液是成批生产,根据冷冻容器大小,细管精液1次放置冷冻罐中每支细管精液的始冻温度是一致的,并减少了外界气温的影响,降温速度加快,能迅速地越过危险温区。颗粒型冷冻精液是陆续逐粒滴在冷冻板上,因此造成精液颗粒之间始冻温度出现差异,随着滴冻精液数量的增加,冷冻面的温度回升,始冻温度也在不断回升。由于冷冻板质量及导热性能的差异,是在外界气温环境下进行操作,因此精液的降温速度缓慢,通过危险区的时间延长,很容易进行精液的危险温区内的冷冻。目前我们使用氟板冻制颗粒精液效果好,在于其绝热性能好,具有一定的厚度和重量。因此,陆续滴在经过预冷好的这种冷冻氟板的精液不会因热传导而相互影响,能较好地保持原有的始冻温度。减少颗粒精液之间的始冻温度差异,从而提高了冻后活率。在滴冻过程中还应注意提高滴冻速度,滴冻结束后,容器加盖,以减少外界气温下的暴露时,以保持冷冻温度。
三、冷冻时间技术要求
在精子冷冻过程中,随着温度的变化,时间也要严格控制,时间的长短直接影响整批精液冻后活率。细管型精液的速冻除了观察始冻温度的变化和散热过程,要求快速通过危险温区,然后尽快下降到要求的适宜温度,这段变化需几分钟完成,时间不能太短也不能太长,否则精子活率低,造成精液损失。颗粒冻精选用氟板作为冷冻面,当精液放置后温度上升到最高点,即为精液下降温度与冷冻面上升温度达到一致,然后逐渐下降至要求的适宜温度,通过快速冷冻,方可获得活率高,顶体完整率高的优质冻精,所以应把握好滴冻时间,以短时为宜。
第九节 提高绒山羊冷冻精液配种受胎率的技术措施
一、适时输精
准确掌握母羊发情规律,要做到适时输精。在实际中常采取公羊试情和阴道检查相结合的方法进行发情鉴定。我们采取公羊试情和阴道检查法相结合进行发情鉴定。发情初期,母羊呜叫,食欲减退,喜欢接近试情公羊或爬跨其它母羊。子宫颈外口微开张,呈粉红色,黏液量少,稀薄似水样,此时不能输精。发情盛期,发情母羊接受试情公羊爬跨。子宫颈口开张,呈粉红色,黏液量多,呈胶水样,并逐渐由透明变浑浊,此时正适于输精。发情后期,母羊表现逐渐安稳,黏液量减少且多呈乳块状,子宫颈口闭合,此时不宜输精。一般在发情母羊发情后24 h即母羊稳栏时进行第1次输精,问隔8~12 h进行第2次输精,此时子宫颈开张良好,黏液浑浊,输精受胎率高。
二、严格执行技术操作规程
绒山羊冻精配种工作难度较大,对工作中的各个环节技术要点要超常严谨,出现细微差错便会前功尽弃。
1. 清洗和消毒 每天配种结束后,对使用过的各种器械要先清洗几遍,然后用蒸馏水冲洗1~2次,待次日配种前再进行高温消毒;对待配母羊的外阴部用清水洗去污物,后用0.1%的高锰酸钾溶液擦洗消毒,并用医用棉球揩干,防止污物带进阴门,以减少精液污染;输精人员自身要卫生清洁,操作室要清洁并定期消毒灭菌。
2.等温等渗 在温度低的季节,凡是接触精液的器械都必须预温,尤其是输精器和开腥器,以防精于休克和母羊痉挛。器材也决不能沾附水珠,使用前需用生理盐水或解冻液冲洗一遍。
3.冷冻精液的解冻 冻精品质的好坏是决定母羊受胎率高低的基础条件。首先例入茶缸内适量的开水,用水温计调节水温达到要求温度(一般颗粒精液要求40℃~42℃,细管精液要求60℃~62℃),用吸管取0.5毫升解冻液注入试管后,将试管放入茶缸热水中。若是颗粒型冷冻精液可直接从液氮罐内取出放入试管内轻轻摇动全融即可;若是细管型冷冻精液则需用镊子从液氮罐内迅速夹出,放在试管口处,用剪刀快速剪断,一般剪4—5刀,迅速轻摇全融即可。随后用输精管吸出少许进行镜检,合格的以备输精。总之,操作要掌握四快:即精液从液氮罐内快取,往预热好的解冻液中快投,适度摇动促其快融,解冻后快输。这样才能保证解冻后的精子有较高的活率,为提高受胎率打下良好的基础。
4.熟练掌握输精技术 首先保定好母羊,(可用一根长1 m左右的木棒伸人母羊腹下,将羊后躯抬起,一人保定头部),用消毒毛巾擦拭阴部,输精者将开膣器插入阴道,找到子宫颈外口,当感觉有破纸感时即可输精。一般在—个情期输精2次,输精深度0.5~1厘米,输精量每只每次0.2毫升。此外,要根据母羊体形大小使用相应型号的开膣器,整个输精过程动作要轻缓,切忌粗暴,以防止造成阴道内膜损伤出血,影响受胎率。整个输精过程动作要轻缓,切忌粗暴操作。值得注意的是,羊群中大约有10%的母羊子宫颈外口有一瓣膜,输精前可用输精器别一下,才能通过子宫须外口输精,否则输精很难受胎。
三、 加强饲养管理,提高受胎率
营养水平对母羊性机能活动有很大影响。母羊在配种时膘满体壮,体重达最佳状态,可使母羊性腺活动旺盛,增加排卵数,且发情集中、整齐,容易配种受胎。因此,配种前要注意母羊的营养供给。短期优饲,增加排卵满膘配种是提高受胎率的关键,因为营养水平对母羊性机能活动有很大影响,所以,母羊在配种时膘满
四、记录与复查
详细做好配种记录,对下1个情期返回复配的母羊,要查明原因,及时补配。对患有子宫疾患或瘦弱母羊要及时治疗和指导增膘措施。
第十节 提高绒山羊繁力的有效方法
一、保持羊群正常的年龄结构
绒山羊母羔6月龄左右就有排出正常卵子的能力,12月龄时就可以受配繁殖后代,以后其繁殖能力逐年上升,到5~8岁时达到顶峰,以后逐年下降。因此,应选留好适龄母羊并保持相当的数量。壮龄母羊最好保持在6O%~ 7O%,对提高群体的产羔量和繁殖力具有重要作用。
二、 用好高繁殖力羊的遗传优势
母羊产双羔率高,其后代的双羔率也高。因此,利用好这一遗传优势,可提商后代的繁殖力,具体选配,可选择以优配优,或选择产羔率较高的公羊和产羔率较低的母羊群体配种,就会提高该群体的产羔率。
三、种羊的营养水平影响繁殖力
对配种公羊来说,允足的营养可以提高公羊的性欲,增强体质,提高精子数量和活力,能满足配种需要。营养水平低。种羊体质差,会影响性欲,其精子质量也差,后代成活率也较低。对母羊来说,短期优饲可刺激母羊多排卵,捉高母羊的产羔率。
配种母羊体重的增加,其繁殖成活l率亦随之提高。因此,配种前实行“短期优伺”,以迅速提高母羊配种前的体重,达到良好膘度配种是非常重要的。据实验证明,膘情好的可提高繁殖成活率1.5%~20%。1岁、2岁、3岁以上母羊在配种前体重分别保持在25~32kg、30~36kR、33~44k8,繁殖成活率将会有大幅度地提高。
四、 缩短母羊的产羔间隔
具体措施有,早配,一年两产,两年三产。在实际生产中,要看具体情况来实施,比较好的办法是实行“隔年一产,翌年一年两产制。选育个体健壮、繁殖性能好的母羊,实行第1年产2次羔,笫2年产1次羔,,第3年产2次羔。产2次羔的年份要特别注意母羊的营养状况,加强饲养管理,否则会造成母羊生殖紊乱,降低繁殖力。
五、光照和温度影响繁殖力
绒山羊属短日照发情动物,秋分后日照开始短时母羊发情,光照既影响绒毛生长.也影响繁殖力。春季光照时间逐渐变长,母羊发情受到抑制,发情母羊较少。秋季光照逐渐缩短,母羊表现群体发情,其受胎率、产羔率较显高于春季。种公羊也有明显季节性差异,春季公羊的性欲精子活力、完整精子率明显低于秋季同一种公羊在同等营养水平下的状态。在生产实践中,秋羔比春羔的成活率、病死率高的原因与此相关。要发挥繁殖潜力,了解和利用季节性特性,才能获得满意的结果。
温度高于37℃时,则会造成精子、卵子死亡.缩短其生存时间;过低的温度则可造成妊娠母羊流产,死胎增多。因此。配种期要尽量避免温度过高和过低时期,妊抓母羊在夏季要做好防暑.以利保胎。
六、加强饲养管理、防止母羊不孕和流产
造成母羊不孕的主要原因有生殖器官疾病、内分泌紊乱、种公羊精子质量不佳、某些疫病如布病等。
流产的原因主要有气温太低、环境条件恶劣、近亲繁殖、营养不良、母体瘦弱某些疾病、药物作用和饲料发霉等。此外,饲养水平低、管理差也是繁殖力低的原因之一。为此.应加强饲养管理.提高种羊体质,防止种羊生病,保持常繁殖力。